Diagnosis molekul sesuai dengan satu set teknik molekul yang bertujuan untuk mengenal pasti perubahan DNA yang mungkin menunjukkan penyakit genetik atau kanser, misalnya. Di samping itu, teknik molekul digunakan secara meluas untuk pengenalpastian dan pengesahan penyakit berjangkit, kerana ia mewakili kaedah diagnostik yang lebih cepat dan lebih tepat.
Diagnosis molekul adalah mahal dan oleh itu tidak terlalu kerap diminta oleh doktor, bagaimanapun, ia memberikan hasil yang tepat mengenai kehadiran perubahan itu, cara ia dapat mengganggu fungsi organisme dan tindak balas pesakit terhadap penyakit ini. rawatan.
Apa untuknya
Diagnosis molekul boleh dilakukan dengan beberapa objektif, yang utama ialah:
- Pengenalpastian mutasi yang berkaitan dengan leukemia, seperti pengenalan transkripsi BCR-ABL, yang merupakan ciri Leukemia Myeloid Kronik (CML);
- Mutasi ciri-ciri penyakit hematologi, seperti hemochromatosis keturunan, polycythemia vera, thrombocythemia penting dan thrombophilias, misalnya - memahami apa trombofilia dan bagaimana rawatan dilakukan;
- Perubahan molekul yang menunjukkan berlakunya kanser, seperti kolorektal, paru-paru, kanser payudara dan otak, sebagai contoh;
- Diagnosis penyakit berjangkit seperti hepatitis, urethritis, toxoplasmosis, leishmaniasis, dan lain-lain, selain mengenal pasti virus HPV .
Diagnosis molekul, walaupun dianggap mahal jika dibandingkan dengan teknik diagnostik lain, lebih tepat kerana ia dapat memaklumkan perubahan yang berkaitan dengan penyakit tertentu dan tahap pengaruh perubahan ini dalam organisma, oleh itu membantu rawatan orang itu.
Di samping digunakan untuk diagnosis pelbagai penyakit, teknik molekul juga digunakan untuk menilai tindak balas terhadap rawatan, terutama pada orang yang mempunyai kanser, sebagai salah satu kaedah yang paling berkesan untuk menunjukkan evolusi penyakit dan kambuh.
Bagaimana ia dilakukan?
Diagnosis molekul boleh dilakukan dengan sampel mana-mana, dan doktor diminta memberikan maklumat mengenai keadaan pesakit, yang mungkin air kencing, air liur atau, kebanyakan masa, darah. Ia tidak perlu berpuasa atau apa-apa persediaan lain untuk peperiksaan.
Sampel dikumpulkan dan dihantar ke makmal bersama-sama dengan nasihat doktor yang memaklumkan peperiksaan atau jenis penyelidikan yang perlu dilakukan. Teknik molekul yang dilakukan bergantung pada pemeriksaan yang diminta dan melibatkan satu siri prosedur yang tepat yang tujuan utamanya adalah untuk mengenali kehadiran atau ketiadaan perubahan yang diminta oleh doktor.
Biasanya hanya sedikit sampel yang digunakan, selebihnya disimpan supaya, jika perlu, ujian diulang.
Lihat apa teknik molekul utama
PCR
PCR, pendek untuk Reaksi Rantai Polimerase, adalah teknik molekul yang terdiri daripada menguatkan serpihan bahan genetik, sama ada DNA atau RNA, dengan matlamat mengenal pasti mutasi dan, dengan itu, membantu dalam diagnosis penyakit.
Teknik ini dibuat dari pengekstrakan dan pemurnian bahan genetik, yang kemudiannya diletakkan dalam campuran di mana salah satu komponennya adalah enzim pembatas yang berbeza-beza mengikut pemeriksaan yang diminta dan yang berfungsi untuk memotong bahan menjadi fragmen untuk mengenal pasti perubahan genetik yang mungkin. Campuran diletakkan dalam termokycler, yang merupakan alat yang bertindak melalui variasi suhu yang ditunjukkan oleh profesional mengikut peperiksaan dan, dengan cara ini, membolehkan penguatan serpihan genetik. Dalam kes konvensional PCR, selepas penguatan, produk PCR tertakluk kepada elektroforesis, yang merupakan teknik molekul berdasarkan berat dan saiz serpihan, iaitu mengikut ciri-ciri ini corak jalur dihasilkan, analisis yang dilakukan berdasarkan pada band kawalan positif, iaitu, dalam band yang diketahui sesuai dengan perubahan genetik.
PCR masa nyata, yang juga dipanggil qPCR, adalah sejenis PCR kuantitatif, iaitu, sebagai tambahan untuk mengenal pasti pengubahan genetik, ia dapat memberi maklumat tentang ekspresi gen, iaitu berapa banyak gen diubah yang dinyatakan dalam organisma, dan boleh digunakan untuk membantu diagnosis dan memantau rawatan. PCR masa nyata tidak memerlukan elektroforesis, keseluruhan proses penguatan dan analisis bahan genetik dilakukan oleh alat dan hasilnya diinterpretasikan oleh profesional kesihatan terlatih.
Urutan
Sequencing adalah teknik molekul yang terdiri daripada menentukan urutan nukleotida DNA. Sequencing berlaku dari reaksi seperti PCR, bagaimanapun, dalam campuran amplifikasi, nukleotida yang diubah suai oleh penambahan fluorochromes ditambahkan, apabila bahan diperkuat, nukleotida diubah suai dimasukkan ke dalam DNA dan menghasilkan beberapa serpihan, yang sesuai dengan produk penjujukan.
Produk tindak balas diletakkan di dalam alat yang dipanggil pengatur DNA, di mana sebagai serpihan disentuh oleh laser radas, fluorochromes teruja, memancarkan pendarfluor, yang ditunjukkan oleh radas dengan puncak, masing-masing puncak yang sama kepada nukleotida. Pada akhir tindak balas peralatan akan memberitahu urutan DNA, dengan itu membantu doktor dalam diagnosis penyakit genetik.
